СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ БАКТЕРИИ ВИДА ACIDOVORAX AVENAE SUBSP. AVENAE МЕТОДОМ ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ С ГИБРИДИЗАЦИОННО-ФЛУОРЕСЦЕНТНОЙ ДЕТЕКЦИЕЙ В РЕЖИМЕ «РЕАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ» (ПЦР-РВ)

Наименование РИД	СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ БАКТЕРИИ ВИДА ACIDOVORAX AVENAE SUBSP. AVENAE МЕТОДОМ ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ С ГИБРИДИЗАЦИОННО-ФЛУОРЕСЦЕНТНОЙ ДЕТЕКЦИЕЙ В РЕЖИМЕ «РЕАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ» (ПЦР-РВ)
Реферат	Изобретение относится к области молекулярной биологии и может быть использовано в сельском хозяйстве, в частности, в лабораторной диагностике для выявления бактерии – возбудителя бактериальной полосатости и ожога листьев злаков Acidovorax avenae subsp. avenae в пробах и (или) образцах продукции растительного происхождения, а также для решения научно-исследовательских задач по изучению данного микроорганизма. Способ выявления бактерии вида ACIDOVORAX AVENAE SUBSP. AVENAE методом полимеразной цепной реакции с гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме «реального времени» (ПЦР-РВ) в бактериальных культурах и экстрактах семян пшеницы твердой (Triticum durum Desf.), растений стрелиции королевской (Strelitzia reginae Banks), тимофеевки луговой (Phleum pretense L.) и семян перистощетинника (Pennisetum Rich.) в концентрации 8,37×102 КОЕ/мл и выше, в экстрактах растений и семян пшеницы мягкой (Triticum aestivum L.), растений и семян райграса однолетнего (Lolium multiflorum Lam.), растений и семян ячменя обыкновенного (Hordeum vulgare L.), растений и семян ржи посевной (Secale cereale L.), растений и семян тритикале (×Triticosecale Wittm. ex A.Camus), растений и семян кукурузы обыкновенной (Zea mays L.), растений полевицы побегообразующей (Agrostis stolonifera L.), семян просо посевного (Panicum miliaceum L.), растений и семян щетинника низкого (Setaria pumila (Poir.) Roem. & Schult.), растений чая китайского (Thea sinensis L.), растений лисохвоста (Chaetochloa lutescens), растений риса посевного (Oryzae sativa L.), растений сорго зернового (Sorghum bicolor (L.) Moench), семян сорго (Sorghum), растений ячменя гривастого (Hordeum jubatum L.), растений ежи сборной (Dactylis glomerata L.), растений и семян росички (Digitaria Haller), растений ежовника обыкновенного (Echinochloa cruss-gali (L.) P.Beauv.), растений шерстняка мохнатого (Eriochloa villosa (Thunb.) Kunth) и семян сорго алеппского (Sorghum helepense (L.) Pers.) в концентрации 8,37×103 КОЕ/мл и выше, в экстрактах растений пшеницы твердой (Triticum durum Desf.), растений сахарного тростника благородного (Saccharum officinarum L.), растений мятлика однолетнего (Poa annua L.) и семян риса посевного (Oryzae sativa L.) в концентрации 8,37×104 КОЕ/мл и выше, включающий два праймера GAF-F/GAF-R и зонд GAF-P,при этом прямой праймер GAF-F 5`-CTTCTGCGACCACACCATC-3`, имеет длину 19 п.о., GC-состав 58% и Tm=60°C; обратный праймер GAF-R 5`-ACGGTGTCGATGAGGCACA-3`, имеет длину 19 п.о., GC-составом 58% и Tm=60°C; зонд GAF-P 5`-6FAM-GTCATGGTGGTGGAAGACGCGCT-BHQ1-3`, имеет длину 23 п.о., GC-составом 61% и Tm=68°C, условия ПЦР-РВ, а именно, программа амплификации включает один цикл 95°C – 5 мин, далее – 45 циклов, включающие этапы 95°C – 15 с, 60°C – 40 с. и состав реакционной смеси оценивается из расчета на одну пробу общим объемом 25 мкл., в частности, 10 пикомоль каждого праймера, 5 пикомоль зонда, 2 мкл ДНК-матрицы. Изобретение позволяет оперативно выявлять бактерию вида A. avenae subsp. avenae среди бактериальных культур и в экстрактах семян пшеницы твердой (Triticum durum Desf.), растений стрелиции королевской (Strelitzia reginae Banks), тимофеевки луговой (Phleum pretense L.) и семян перистощетинника (Pennisetum Rich.) в концентрации 8,37×102 КОЕ/мл и выше, в экстрактах растений и семян пшеницы мягкой (Triticum aestivum L.), растений и семян райграса однолетнего (Lolium multiflorum Lam.), растений и семян ячменя обыкновенного (Hordeum vulgare L.), растений и семян ржи посевной (Secale cereale L.), растений и семян тритикале (×Triticosecale Wittm. ex A.Camus), растений и семян кукурузы обыкновенной (Zea mays L.), растений полевицы побегообразующей (Agrostis stolonifera L.), семян просо посевного (Panicum miliaceum L.), растений и семян щетинника низкого (Setaria pumila (Poir.) Roem. & Schult.), растений чая китайского (Thea sinensis L.), растений лисохвоста (Chaetochloa lutescens), растений риса посевного (Oryzae sativa L.), растений сорго зернового (Sorghum bicolor (L.) Moench), семян сорго (Sorghum), растений ячменя гривастого (Hordeum jubatum L.), растений ежи сборной (Dactylis glomerata L.), растений и семян росички (Digitaria Haller), растений ежовника обыкновенного (Echinochloa cruss-gali (L.) P.Beauv.), растений шерстняка мохнатого (Eriochloa villosa (Thunb.) Kunth) и семян сорго алеппского (Sorghum helepense (L.) Pers.) в концентрации 8,37×103 КОЕ/мл и выше, в экстрактах растений пшеницы твердой (Triticum durum Desf.), растений сахарного тростника благородного (Saccharum officinarum L.), растений мятлика однолетнего (Poa annua L.) и семян риса посевного (Oryzae sativa L.) в концентрации 8,37×104 КОЕ/мл и выше. Изобретение может быть использовано как метод выявления A. avenae subsp. avenae в рутинной лабораторной диагностике. 1 н.п. ф-лы, 6 табл., 41 ил.
Возможные направления использования	Изобретение позволяет оперативно выявлять A. avenae subsp. avenae среди бактериальных культур и в экстрактах семян пшеницы твердой (Triticum durum Desf.), растений стрелиции королевской (Strelitzia reginae Banks), тимофеевки луговой (Phleum pretense L.) и семян перистощетинника (Pennisetum Rich.) в концентрации 8,37102 КОЕ/мл и выше, в экстрактах растений и семян пшеницы мягкой (Triticum aestivum L.), растений и семян райграса однолетнего (Lolium multiflorum Lam.), растений и семян ячменя обыкновенного (Hordeum vulgare L.), растений и семян ржи посевной (Secale cereale L.), растений и семян тритикале (×Triticosecale Wittm. ex A.Camus), растений и семян кукурузы обыкновенной (Zea mays L.), растений полевицы побегообразующей (Agrostis stolonifera L.), семян просо посевного (Panicum miliaceum L.), растений и семян щетинника низкого (Setaria pumila (Poir.) Roem. & Schult.), растений чая китайского (Thea sinensis L.), растений лисохвоста (Chaetochloa lutescens), растений риса посевного (Oryzae sativa L.), растений сорго зернового (Sorghum bicolor (L.) Moench), семян сорго (Sorghum), растений ячменя гривастого (Hordeum jubatum L.), растений ежи сборной (Dactylis glomerata L.), растений и семян росички (Digitaria Haller), растений ежовника обыкновенного (Echinochloa cruss-gali (L.) P.Beauv.), растений шерстняка мохнатого (Eriochloa villosa (Thunb.) Kunth) и семян сорго алеппского (Sorghum helepense (L.) Pers.) в концентрации 8,37103 КОЕ/мл и выше, в экстрактах растений пшеницы твердой (Triticum durum Desf.), растений сахарного тростника благородного (Saccharum officinarum L.), растений мятлика однолетнего (Poa annua L.) и семян риса посевного (Oryzae sativa L.) в концентрации 8,37*104 КОЕ/мл и выше. Изобретение может быть использовано как метод выявления A. avenae subsp. avenae в рутинной лабораторной диагностике.
Количество опытных образцов	0
Количество просмотров	4
Наличие дополнительных файлов	True
Использование РИД правообладателем	False
Внешнее использование РИД	False
НИОКТР (JSON)	{}
ИКСИ (JSON)	[]
ИКСПО (JSON)	[]
ОЭСР (JSON)	[]
Дата первого статуса	2026-01-15T11:47:40.590224+00:00
Предполагаемый тип результата	Изобретение
Ожидаемая роль	Исполнитель
Заказчик	Федеральная служба по ветеринарному и фитосанитарному надзору
Руководитель работы	Словарева Ольга Юрьевна
Руководитель организации	Соловьев Александр Александрович
Регистрационный номер НИОКТР	124022800055-1
Последний статус	Подтверждена, 626012800202-3, 2026-01-28 09:29:57 UTC
ОКПД	Услуги, связанные с научными исследованиями и экспериментальными разработками в области биологических наук
Ключевые слова	идентификация; фитосанитарные требования; биобезопасность; карантин растений; экспорт зерна; фитопатогенные бактерии; выявление; молекулярно-генетические методы идентификации
Исполнители	Федеральное государственное бюджетное учреждение "Всероссийский центр карантина растений"
Авторы	Тихонова Екатерина Николаевна; Трошкова Анастасия Андреевна; Агаркова Надежда Алексеевна; Яремко Анастасия Богдановна; Гарибян Цовинар Саркисовна; Словарева Ольга Юрьевна; Соловьев Александр Александрович
Коды тематических рубрик	68.37.13 - Методы защиты растений от вредителей, болезней и сорняков; 68.37.31 - Болезни растений и борьба с ними; 34.27.19 - Рост и культивирование микроорганизмов; 68.37.05 - Прогнозы и сигнализация появления и развития вредителей, болезней растений и сорняков
OESR	Сельскохозяйственные науки
Приоритеты научно-технического развития	д) противодействие техногенным, биогенным, социокультурным угрозам, терроризму и экстремистской идеологии, деструктивному иностранному информационно-психологическому воздействию, а также киберугрозам и иным источникам опасности для общества, экономики и государства, укрепление обороноспособности и национальной безопасности страны в условиях роста гибридных угроз;