| Аннотация |
Цепецентрическим рецептором называют Т-клеточный рецептор (TCR), в котором лишь одна из цепей определяет его специфичность, тогда как другая может быть случайной и влияет на аффинность взаимодействия TCR с MHC/пептидным комплексом. Наша исследовательская группа обнаружила существование таких TCR, когда мы создали трансгенную линию мышей с экспрессией индивидуальной альфа-цепи TCR клеток памяти, специфичных к молекуле H-2Kb клеток лимфомы EL4. Несмотря на то, что у этих животных отсутствовал трансген парной бета-цепи TCR, полученные мыши полностью отторгали клетки лимфомы EL4 за 3 дня вместо 10-12 дней, обычных для мышей дикого типа. Т-лимфоциты таких животных экспрессировали трансген альфа-цепи и содержали повышенный процент клеток
CD44+CD62L+, характерный для долгоживущих клеток памяти (central memory cells). В работах по проекту №22-15-00342 в 2022-2024 гг., поддержанному РНФ, мы использовали технику NGS-секвенирования для выявления антигенспецифических клонов и определения частот цепецентрических TCR в репертуарах первично активированных антигеном Т-клеток и клеток памяти, реактивированных тем же антигеном. Охарактеризованы изменения в репертуаре Т-лимфоцитов в ходе ответа на антигены гистосовместимости аллогенной опухоли и
показано, что цепецентричность является свойством, исходно присущим ~10% репертуара Т-клеточных рецепторов наивных Т-лимфоцитов, отвечающих на антиген в первичном иммунном ответе. Показано также, что в ходе становления иммунологической памяти доля таких рецепторов в репертуаре иммунных Т-клеток возрастает до ~30%. Возможным механизмом такого возрастания может быть клональная конкуренция вследствие того, что цепецентрические TCR предпочтительно взаимодействуют с иммунизирующими MHC/пептидными комплексами по сравнению с обычными TCR. Причины такого предпочтительного взаимодействия с иммунизирующим антигеном в данный момент неясны. Мы предлагаем гипотезу, согласно которой в ходе завершения иммунного ответа имеет место редактирование генов альфа-цепей TCR иммунных Т-клеток в тимусе, приводящее к эффекту, аналогичному процессу «созревания аффинности» B-лимфоцитов. В планируемых работах 2025-2026 гг. эта гипотеза будет исследована: 1) Путем анализа экспрессии рекомбиназ RAG-1,2 в пуле кортизонрезистентных клеток памяти, локализованных в тимусе. Наличие их в клетках памяти в количествах, сопоставимых с развивающимися тимоцитами укажет на активность процессов редактирования их TCR. 2) Путем анализа размеров пула и функциональности кортизонрезистентных клеток в тимусе полученных нами трансгенных мышей с экспрессией альфа-цепи цепецентрического TCR. Следует ожидать, что у трансгенных животных размеры этого пула будут увеличены по сравнению с животными дикого типа. 3) Будут проведены работы по подготовке методической базы лонгитудинальных исследований репертуаров антигенспецифических Т-лимфоцитов в ходе иммунного ответа и формирования иммунологической памяти у индивидуальных организмов. Поскольку экспрессия генов альфа-цепей TCR не подчинена правилам аллельного исключения, стало возможным вводить их генетические конструкции в
зиготу и получать организмы, устойчивые к тем или иным патогенам с момента рождения. В данный момент нами создана и используется линия трансгенных животных, ускоренно и специфически отторгающая клетки лимфомы EL4, но прямая демонстрация аналогичного эффекта на инфекционной модели пока не осуществлена. Используя полученные нами ранее результаты поиска альфа-цепей
TCR, защищающих мышей от сальмонеллеза после трансдукции их в Т-лимфоциты, в 2022-2024 гг., мы начали создавать трансгенных животных с врожденной устойчивостью к этому заболеванию. В 2025-2026 гг. эти работы будут продолжены.
|
