| Аннотация |
Вирус иммунодефицита человека (ВИЧ), несмотря на достигнутый прогресс в лечении ВИЧ-инфекции, по-прежнему представляет серьезную угрозу человечеству. Высокая скорость мутаций вирусных белков, а также нарушение пациентами режимов терапии ВИЧ-инфекции приводят к появлению в популяции штаммов вируса, устойчивых к
действию антиретровирусных препаратов. Такие штаммы встречаются даже у пациентов, еще не получавших антиретровирусную терапию. Для борьбы с лекарственно-устойчивыми штаммами вируса необходимо разрабатывать новые подходы, которые требуют более тщательных исследований всех стадий жизненного цикла вируса и, в том
числе, изучения клеточных белков, задействованных в репликации ВИЧ-1. Среди этих белков могут быть как ко-факторы ВИЧ-1, т.е. клеточные белки, которые способствуют развитию вирусной инфекции, так и факторы рестрикции ВИЧ-1 - клеточные белки, препятствующие репликации вируса. Ранее в ходе скрининга мишеней ДНК-зависимой
протеинкиназы (DNA-PK), фосфорилирующая активность которой важна для эффективной репарации повреждений, возникающих в клеточном геноме при интеграции в него вирусной ДНК, мы обнаружили, что клеточная АТФ-зависимая хеликаза/экзонуклеаза WRN является фактором рестрикции на ранних этапах жизненного цикла вируса: обратной
транскрипции, интеграции или постинтеграционной репарации. Снижение внутриклеточного уровня WRN с помощью малых интерферирующих РНК приводило к 8-10 кратному повышению инфекционности псевдовируса на основе генома ВИЧ-1. Параллельно при проведении CRISPR/Cas скрининга клеточных генов, кодирующих белки - участники
клеточного ответа на повреждения ДНК, мы обнаружили, что партнер белка WRN - белок WRNIP1 является положительным фактором ранних этапов репликации ВИЧ-1. Надо отметить, что ранее влияния белков WRN и WRNIP1 на ранние этапы жизненного цикла ВИЧ-1 никто не отмечал, однако, существуют немногочисленными литературными данными о том, что оба белка участвуют в процессе транскрипции с вирусного LTR-промотора, причем WRN способствует этому процессу, а WRNIP1, напротив, является фактором рестрикции, т.к. и снижение его внутриклеточного уровня положительно сказывается на эффективности транскрипции ВИЧ-1. Целью настоящего проекта является систематическое изучение влияния WRN и WRNIP1 на ранних и поздних этапах репликации ВИЧ-1, в частности выяснение той стадии (или стадий) жизненного цикла, на которую влияют эти белки, а также характера и механизма этого влияния. Полученные в ходе работы результаты в будущем могут способствовать разработке специфичной терапии ВИЧ-1, которая учитывает различное влияние этих белков на ранние этапы репликации ВИЧ-1. Причем, если окажется, что эти белки действительно оказывают противоположное действие на разные этапы
репликации, то впервые появится потенциальная возможность заблокировать позитивное влияние клеточных белков и сохранить их негативное воздействие на развитие ВИЧ-инфекции.
|
