| Аннотация |
Эпилепсия является одним из распространенных хронических неврологических заболеваний человека, которое проявляется в предрасположенности организма к внезапному возникновению судорожных приступов. Данным заболеванием страдает более 65 миллионов человек во всем мире. Несмотря на наличие широкого спектра противосудорожных препаратов, до 30% пациентов остаются невосприимчивыми к лечению, а способа предотвратить развитие эпилепсии в группах риска не существует. В последние годы появляется все большее количество работ, указывающих на важную роль глиальных клеток и нейрон-глиальных взаимодействий в патогенезе различных заболеваний, в том числе эпилепсии. Глиальные клетки участвуют в регуляции синаптической передачи, поддержании гомеостаза внеклеточной среды, модуляции воспалительных процессов и окислительного стресса, что делает их перспективными мишенями для терапии. Для разработки
действенных стратегий профилактики нарушений, вызванных эпилептическими процессами, необходимо выявить конкретные изменения, происходящие с глиальными клетками. Комплексного анализа изменений, происходящих с астроцитами и микроглией при эпилептогенезе, ранее не проводилось. В этом проекте предлагается комплексное изучение функционального состояния астро- и микроглиальных клеток в различных областях мозга грызунов в латентную и хроническую фазы литий-пилокарпиновой модели височной эпилепсии. Научная новизна данного исследования состоит в идентификации ключевых мишеней, связанных с эпилептогенезом, и применение генной терапии с использованием вирусных векторов, направленной на модификацию работы глиальных клеток. При выполнении проекта на литий-пилокарпиновой модели будет проанализирована динамика экспрессии генов, кодирующих различные астро- и микроглиальные белки, маркеров активации астроцитов и микроглии, белков, участвующих в обеспечении функций глиальных клеток (трофические факторы (BDNF, GDNF и др.), белков, участвующих в метаболизме глутамата (транспортеры
глутамата, глутаминсинтетаза) и нейровоспалении (IL1-β, TNF, NLRP3 и др.), а также белков маркеров поляризации астроцитов (А1/А2) и микроглии (М1/М2) методами ПЦР в реальном времени и вестерн-блоттинга. Также будут изучены локализация и клеточное распределение астро- и микроглиальных белков в различных областях мозга грызунов методами иммуногистохимии. Дополнительно будет произведена оценка эффекта препаратов, влияющих на функциональное состояние глиальных клеток, либо веществ, выделяемых активированными
глиальными клетками, на электрофизиологические характеристики нейронов в норме и в модели височной эпилепсии методом патч-кламп. В первую очередь предполагается исследовать эффект противовоспалительных цитокинов (IL-4, IL-10) и трофических факторов (BDNF, GDNF и др.). На основе полученных данных будет выбрана мишень для проведения генной терапии, направленной на модификацию работы глиальных клеток, и будет протестирована ее эффективность в предотвращении развития эпилепсии.
|
