| Название НИОКТР |
Функциональная роль укороченных форм гемолизина II Bacillus cereus и перспективы их использования в антивирулентной терапии.
|
| Аннотация |
Данное исследование посвящено укороченным формам бета-пороформирующих токсинов (бета-ПФТ), одним из ключевых патогенных факторов бактерий. Бета-ПФТ секретируются бактериями в мономерной форме, в присутствии мембраны клетки-мишени мономеры олигомеризуются с формированием ионного канала в мембране, разрушая клетки хозяина, поэтому изучение бактериальных бета-ПФТ, поиск способов их нейтрализации, а также механизмов их функционирования является безусловно актуальным. Выполненный авторами проект в основном посвящался гемолизину II (HlyII) Bacillus cereus, необходимо понимание распространяются ли полученные данные о существовании укороченных форм, на другие бактериальные бета-ПФТ. В связи с этим авторами расширен спектр исследуемых токсинов на предмет существования их укороченных форм, планируется изучение цитотоксина К2 B. сereus (CytK2) и альфа-гемолизина Staphylococcus aureus (Hla). С учетом имеющегося опыта планируется продолжить разработку вакцинных прототипов. С этой целью будет проведена химическая модификация мутантов токсинов, содержащих аминокислотные остатки цистеина, не способных к олигомеризации, а, следовательно, не способных образовывать ионные каналы в мембране клетки-мишени. Учитывая накопленные данные по иммунизации экспериментальных животных для получения моноклональных антител к отдельным фрагментам HlyII планируется исследовать уровень иммунного ответа организма-хозяина. Соотношение полученных авторами данных по структуре и функции отдельных фрагментов токсина с данными по определению уровня иммунного ответа позволят прояснить направление эволюции бета-ПФТ, приводящее к максимально возможной защите от адаптивного иммунитета хозяина. В ходе выполнения проекта авторы получили нейтрализующие моноклональные антитела, способность которых блокировать гемолитическую активность в большой степени зависела от различий в пространственной структуре токсина, определяющейся аминокислотными остатками пролина. В частности, было получено моноклональное антитело HP-5, узнающее участок аминокислотной последовательности консервативный для изученных бета-ПФТ. Способность одновременно узнавать различные бактериальные бета-ПФТ, была подтверждена на примере HlyII, CytK2 и Hla, блокировать гемолиз – на примере CytK2 и HlyII с делецией С-терминального домена. С помощью сайт-направленного мутагенеза консервативного участка, приводящих к замене аминокислотных остатков, планируется изучить влияние отдельных аминокислотных остатков на защитную способность моноклонального антитела HP-5. Полученные результаты позволят определить функциональную и эволюционную роль консервативного участка в формировании бактериальных бета-ПФТ и в преодолении барьеров иммунной системы хозяина. Авторами подтверждена теория о возможности синтеза в бактериальной клетке нескольких белковых продуктов с одного гена, последовательность которого содержит внутренние стартовые кодоны. Показано, что укороченная форма HlyII синтезируется с внутреннего сайта инициации трансляции Met328. В связи с этим необходимо изучить свойства этого белкового продукта, являющегося частью С-терминального домена. В отдельных компартментах клеток природных штаммов Bacillus sensu lato антителами против различных участков HlyII обнаружены укороченные формы токсинов, необходимо провести их масс-спектроскопическое исследование. Также будут исследованы укороченные формы CytK2 и Hla разработанным методом высокочувствительной детекции в клеточных компартментах с использованием флуоресцентных меток и созданы формы токсинов с заменами предполагаемых внутренних стартовых кодонов. Будет предпринята попытка предсказания возможных функций укороченных форм бактериальных бета-ПФТ с помощью компьютерного моделирования их пространственной структуры.
|
| Доступ к ОКОГУ исполнителя |
False
|
| Количество связанных РИД |
0
|
| Количество завершенных ИКРБС |
0
|
| Сумма бюджета |
12000.0
|
| Дата начала |
2025-09-11
|
| Дата окончания |
2027-06-30
|
| Номер контракта |
22-74-10026- П
|
| Дата контракта |
2025-09-11
|
| Количество отчетов |
2
|
| УДК |
577.29:615
|
| Количество просмотров |
3
|
| Руководитель работы |
Каратовская Анна Петровна
|
| Руководитель организации |
Габибов Александр Габибович
|
| Исполнитель |
ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ НАУКИ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НАУЧНЫЙ ЦЕНТР РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ИНСТИТУТ БИООРГАНИЧЕСКОЙ ХИМИИ ИМ. АКАДЕМИКОВ М.М. ШЕМЯКИНА И Ю.А. ОВЧИННИКОВА РОССИЙСКОЙ АКАДЕМИИ НАУК
|
| Заказчик |
Российский научный фонд
|
| Федеральная программа |
Отсутствует
|
| Госпрограмма |
—
|
| Основание НИОКТР |
Грант
|
| Последний статус |
2025-11-28 18:50:40 UTC, 2025-11-28 18:50:40 UTC
|
| ОКПД |
Услуги, связанные с научными исследованиями и экспериментальными разработками в области биологических наук
|
| Отраслевой сегмент |
—
|
| Минздрав |
—
|
| Межгосударственная целевая программа |
—
|
| Ключевые слова |
иммуноферментный анализ; моноклональные антитела,; гемолизин II Bacillus cereus,; Бета- пороформирующие токсины,
|
| Соисполнители |
—
|
| Типы НИОКТР |
Фундаментальное исследование
|
| Приоритетные направления |
—
|
| Критические технологии |
—
|
| Рубрикатор |
34.15.63 - Молекулярная фармакология и токсикология
|
| OECD |
—
|
| OESR |
Прочие биологические темы
|
| Приоритеты научно-технического развития |
в) переход к персонализированной, предиктивной и профилактической медицине, высокотехнологичному здравоохранению и технологиям здоровьесбережения, в том числе за счет рационального применения лекарственных препаратов (прежде всего антибактериальных) и использования генетических данных и технологий;
|
| Регистрационные номера |
—
|
