| Аннотация |
Универсальная и многофункциональная сеть цитокинов представляет собой систему, в которой взаимодействуют: сами медиаторы, их рецепторы, обеспечивающие передачу сигнала, растворимые рецепторы и факторы, блокирующие активность цитокинов, а также аутоантитела к цитокинам. При этом действие цитокина на клетку опосредовано именно экспрессией рецепторов и приводит к активации различных сигнальных путей, что способствует развитию воспаления, апоптоза, пролиферации и метаболических изменений в клетках. Изучение сети IL-1 и его рецепторов имеет важное значение для понимания механизмов возникновения различных заболеваний, связанных с хроническим воспалением и иммунодисбалансом, а также для разработки новых подходов к лечению этих состояний. Оба типа рецептора IL1 являются активными участниками патогенеза иммуноопосредованных заболеваний, в число которых входит ревматоидный артрит и бронхиальная астма, при этом механизмы, по которым клетка «выбирает» тот или иной ответ на действие цитокина до сих пор остаются неизвестными. Определяющими факторами при этом являются уровень самого цитокин, уровень экспрессии и соотношения различных типов рецепторов на клеточной поверхности, процент клеток и абсолютное количество рецепторов. В нашей работе будет проведена оценка коэкспрессии двух типов рецепторов, что позволит оценить их соотношение в пределах одной популяции клеток. Одновременно с этим будет определяться и количество рецепторов на клетках, с использованием технологии калибровочных бус Quantum, которая позволит пересчитывать интенсивность флюоресценции для обоих типов рецепторов, что повысит достоверность полученных данных. Мы предлагаем комплексный подход для оценки системы IL-1 и его мембраносвязанных рецепторов. Внутри одной популяции клетки могут выполнять различные функции, зачатую противоположные, поэтому оценка экспрессии на основных популяциях таких как моноциты, В-лимфоциты и Т-лимфоциты и субпопуляциях Т-лимфоцитов, включающих общий пул CD4+, СВ8+ клеток, активированные хелперные и цитотоксические клетки, клетки памяти среди хелперных и цитотоксических Тлимфоцитов, а также регуляторные клетки условно-здоровых доноров будет более полно отражать картину. Это позволит определить нормативные показатели и оценить потенциальные возможности клеток отвечать на действие цитокина и провести сравнения этих данных с показателями больных ревматоидным артритом (РА) и бронхиальной астмой (БА), с последующей оценкой участия системы рецепторов данного цитокина для каждой из 12 субпопуляций клеток при развитии этих заболеваний. Использование математического анализа полученных результатов позволит провести сопоставление трендов перераспределения экспрессии рецепторов, характерных для РА и БА, определить ключевые различия в паттернах распределения рецепторов, а также выявить новые критерии обострения РА и БА. Дополнительно у доноров и пациентов с иммуноопосредованными заболеваниями планируется оценить содержание в сыворотке самого цитокина, растворимых рецепторов и IL-1Ra. Также планируется проведение функциональных проб с мононуклеарными клетками доноров и пациентов, что позволит, изучить потенциальные возможности разных субпопуляций иммунокомпетентных клеток отвечать на действие цитокина в норме и изменения, связанные с РА и БА, а также выявить уровень цитокина способный вызвать значимый ответ клеток. Одновременная оценка большого количества показателей позволит получить достоверные данные, выявить корреляционные связи и получить наиболее полную картину, отражающую молекулярные механизмы в системе IL1 при иммунопатогенезе. Полученные в проекте данные позволят обосновать новые фундаментальные взаимосвязи между уровнями экспрессии и ко-экспрессии рецепторов на 12 субпопуляциях иммунокомпетентных клетках и участием системы IL-1 в норме и при патологических процессах и позволят сформировать обоснование для разработки новых подходы таргетной патогенетической терапии при иммуноопосредованных заболеваниях
|
