| Аннотация |
Естественные киллеры (NK-клетки) матки представляют особую популяцию NK-клеток (Carrega and Ferlazzo 2012, Yu et al. 2013, Gomez-Lopez et al. 2010, Feyaerts et al. 2024). Нарушение взаимодействия клеток плодового происхождения (трофобласта), инвазирующих в слизистую матки, и NK-клеток ассоциировано с развитием бесплодия (Giuliani et al. 2014, Junovich et al. 2013), изменения экспрессии цитотоксических рецепторов NK-клетками описаны при эндометриозе (Alimoradi Fard et al. 2024). Однако, несмотря на доказанную ассоциацию нарушения функциональной активности NK-клеток и развития репродуктивных патологий, на сегодняшний день не известно, возможно ли влиять на характер взаимодействия NK-клеток с клетками трофобласта, не определены возможные таргетные модуляторы этого взаимодействия.
Одним из цитокинов, влияющих на функции NK-клеток in vivo, является TGFβ (Marcoe et al. 2012, Shokouhifar et al. 2021). В ряде исследований продемонстрировано, что первичные клетки трофобласта секретируют TGFβ (Prossler et al. 2014, Ma et al. 2020). Связывание TGFβ с рецептором приводит к активации белка SMAD2/3, взаимодействию с SMAD4 и транслокации в ядро (Shi and Massague 2003). Для NK-клеток периферической крови (pNK) и клеток линии NK-92, воспроизводящих фенотипические и функциональные характеристики pNK-клеток, продемонстрировано, что TGFβ вызывает активацию SMAD-зависимого пути передачи внутриклеточного сигнала (Yang et al. 2013, Trotta et al. 2008). Таким образом, TGFβ, секретируемый клетками трофобласта, может подавлять функции NK-клеток за счет активации SMAD-зависимого пути. В литературе описано, что селективное блокирование рецептора TGFβRI приводит к снижению фосфорилирования белков SMAD2/3 (Serova et al. 2015, Bueno et al. 2008). Установлено влияние селективного блокирования TGFβRI на экспрессию NK-клетками цитотоксических рецепторов NKp30 и NKG2D (Tran et al. 2017). В связи с этим в проекте планируется изучить влияние блокирования сигнала от TGFβR на взаимодействие NK-клеток с клетками трофобласта.
Другим способом влияния на характеристики NK-клеток представляется специфическое воздействие на мультисубъединичный комплекс Mediator, являющийся регулятором транскрипции, обеспечивающим взаимодействие ген-специфичных транскрипционных факторов и РНК полимеразы II. Важным этапом сборки медиаторного комплекса является фосфорилирование домена РНК полимеразы II, которое осуществляет киназа CDK7 (Wang et al. 2021, Chen et al. 2021). Селективное связывание CDK7 вызывает блок пролиферации клеток и активацию программы апоптоза (Rusan et al. 2018, Kalan et al. 2017). В литературе представлены данные касательно применения ингибиторов CDK7 в качестве противоопухолевой терапии (Sava et al. 2020, Song et al. 2024, Chen et al. 2024). Участие CDK7 в регуляции дифференцировки NK-клеток, в том числе в контексте взаимодействия с клетками маточно-плацентарного комплекса, остается малоизученной.
Целью проекта является оценка возможности влияния на функциональную активность NK-клеток в системе контактного взаимодействия с клетками трофобласта и помощью низкомолекулярных ингибиторов внутриклеточной передачи сигнала. Новизна проекта состоит в оценке влияния специфических ингибиторов TGFβRI и CDK7 на параметры цитотоксической активности клеток линии NK-92, их транскрипцию генов поверхностных рецепторов и секреторную активность, после чего на основании полученных данных будет выбран один из ингибиторов и проведено исследование его эффектов в отношении NK-клеток периферической крови. На основании результатов работы можно будет сделать выводы о принципиальной возможности влияния на взаимодействие NK-клеток с клетками трофобласта.
|
